定植苗木，可以在当年秋季或第二年春季定植，苗木生长发育差异不大。秋季只要土壤不封冻，均可定植，北方产区需要埋土防寒，葡萄苗木最好在春季定植。若采用温室、温床和阳畦培养的营养袋绿苗定植，可在露地葡萄萌芽后1个月左右定植。夏季绿苗定植效果也较好，成活率可达85%以上，且生长量大。采用直插建园，必须在第二年的春季萌芽前扦插。
定植方法有以下3种。
(1) 苗木定植。苗木必须经过检疫，走法律程序；苗木须经过消毒，这也是葡萄健康栽培的必备程序。在定植前将购人的苗木浸没在1 000倍50%辛硫磷乳油和1 500倍25%嘧菌酯悬浮剂混合液（或其他内吸性杀菌剂、杀虫剂）12- 24小时，消灭可能带人的病虫害。中国农业科学院植物保护研究所葡萄病虫害研究中心对葡萄苗木消毒采取以下措施：在43-45℃温水中浸泡苗木2小时，再放入硫酸铜和敌敌畏配制的溶液中（100千克水中加入1千克硫酸铜，再加入80%敌敌畏150毫升，混合均匀）浸泡15分钟，晾干后备栽种。
定植前适当修剪根系，保持根系长度在15-20厘米。定植时，将根系尽量舒展，栽植深度以原来苗床的深度为宜。单芽扦插苗适当深栽，以增加根量，提高抗旱、抗寒能力；嫁接苗则露出接口，以免接穗生根，减弱砧木作用。
(2) 绿苗定植。必须带土台定植，以保持根系完整。遇到光照较强、温度较高的天气可搭建遮阴网，以提高定植成活率。
(3) 插条定植。插条经过筛选后，经生根粉处理后即可扦插，扦插时使插条的顶芽与地面平齐，插条最好朝一个方向呈45°角斜插。
